Plásmido Doble Nickase (h) Annexin VII: sc-402823-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Annexin VII consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Annexin VII (h) y el plásmido de doble nickasa Annexin VII (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ANXA7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Annexin VII Anticuerpo (A-1): sc-17815
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Annexin VII | sc-402823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Annexin VII | sc-402823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA7 codifica la anexina VII, una proteína de unión a fosfolípidos dependiente de Ca²⁺ que se asocia con las membranas celulares para coordinar el tráfico de membranas, la exocitosis y la reparación de membranas. La anexina VII contribuye a la dinámica de fusión de vesículas regulada por Ca²⁺ y se ha relacionado con la remodelación del citoesqueleto y con eventos de transducción de señales que dependen de la organización de microdominios lipídicos. A través de sus funciones en endomembranas y en la membrana plasmática, ANXA7 puede influir en las respuestas al estrés y en la homeostasis celular. Se han descrito alteraciones en la expresión o la regulación de ANXA7 en contextos como la biología del cáncer y la investigación de enfermedades neurológicas, lo que respalda el estudio de su función en la proliferación, la migración y las vías de secreción dependientes de Ca²⁺.
Annexin VII El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANXA7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANXA7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANXA7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANXA7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.