Plasmide Double Nickase (h) Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3: sc-401630-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 Double Nickase (h) et le plasmide Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ALDH1A3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 | sc-401630-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 | sc-401630-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ALDH1A3 humaine code l’aldéhyde déshydrogénase cytosolique 1-A3, une enzyme dépendante du NAD(P)+ qui oxyde divers aldéhydes réactifs et contribue à la biosynthèse de l’acide rétinoïque via le métabolisme du rétinaldéhyde. En régulant la détoxification des aldéhydes et la signalisation des rétinoïdes, ALDH1A3 influence l’équilibre rédox cellulaire, les programmes de différenciation et les réseaux transcriptionnels sensibles à l’acide rétinoïque. Des modifications de l’expression d’ALDH1A3 ont été rapportées dans de multiples contextes tumoraux, et cette enzyme est fréquemment utilisée comme marqueur associé à l’état de lignée et au métabolisme des aldéhydes, ce qui motive des études mécanistiques visant à comprendre comment elle façonne des phénotypes prolifératifs et d’adaptation au stress. Ces fonctions relient ALDH1A3 à des voies impliquées dans la gestion du stress oxydatif, la reprogrammation métabolique et la régulation des gènes du développement.
Aldehyde dehydrogenase 1-A3/ALDH1A3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ALDH1A3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ALDH1A3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ALDH1A3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ALDH1A3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.