AK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407286-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AK1 Anticorpo (E-8): sc-365316
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407286-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407286-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A adenilato quinase 1 (AK1) é uma fosfotransferase citosólica que mantém a homeostase dos nucleotídeos de adenina ao catalisar a conversão reversível de ATP e AMP em duas moléculas de ADP, sustentando um tamponamento energético rápido em células com demandas flutuantes. Ao modular as razões locais ATP/ADP/AMP, a AK1 influencia pontos de controle metabólico ligados à glicólise, à fosforilação oxidativa e à sinalização sensível ao AMP, incluindo a comunicação cruzada com respostas celulares ao estresse energético. A atividade da AK1 é particularmente relevante em tecidos com alto fluxo energético, como músculo e eritrócitos, nos quais perturbações no equilíbrio de nucleotídeos podem afetar a contratilidade e a estabilidade das hemácias. Variações na expressão ou na função da AK1 têm sido investigadas no contexto de fenótipos metabólicos e de distúrbios associados à desregulação energética, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para o estudo do metabolismo de nucleotídeos em células humanas.
AK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.