Plásmido Doble Nickase (h) AGTPBP1: sc-405311-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AGTPBP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AGTPBP1 (h) y el plásmido de doble nickasa AGTPBP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AGTPBP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AGTPBP1 Anticuerpo (LM-1A7): sc-134251
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AGTPBP1 | sc-405311-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AGTPBP1 | sc-405311-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGTPBP1 codifica la carboxipeptidasa citosólica 1 (CCP1), una desglutamilasa que recorta las cadenas laterales de poliglutamato en la tubulina y otros sustratos para regular la estabilidad de los microtúbulos y el transporte dependiente de motores. A través del control de las modificaciones postraduccionales de la tubulina, AGTPBP1 influye en la organización del citoesqueleto, el mantenimiento de las prolongaciones neuronales y las vías de tráfico asociadas a los cilios. La alteración de la actividad de AGTPBP1 perturba la dinámica dependiente de microtúbulos y puede afectar la proteostasis y la distribución de orgánulos en células diferenciadas. Las alteraciones genéticas en AGTPBP1 se asocian con fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, lo que respalda su utilidad como diana para estudiar la integridad neuronal y la regulación del citoesqueleto.
AGTPBP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AGTPBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AGTPBP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AGTPBP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AGTPBP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.