Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AGPS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432759
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- AGPS El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico AGPS, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AGPS Anticuerpo (A-2): sc-374201
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
AGPS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432759 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Agps codifica la alquilglicerona fosfato sintasa (AGPS), una enzima peroxisomal que cataliza un paso clave de formación de enlaces éter en la biosíntesis de plasmalógenos. Al controlar las reservas celulares de fosfolípidos éter, AGPS contribuye a la arquitectura de membrana, a la composición de las balsas lipídicas y a la amortiguación redox mediante la capacidad antioxidante asociada a los plasmalógenos. La remodelación lipídica dependiente de AGPS influye en el acoplamiento metabólico peroxisoma–retículo endoplásmico y en una homeostasis más amplia de los glicerofosfolípidos. La alteración del metabolismo de los lípidos éter se ha implicado en fenotipos metabólicos relacionados con los peroxisomas y en disfunción del neurodesarrollo, lo que respalda el uso de la perturbación de Agps para modelar defectos lipídicos a nivel de vía en sistemas murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO AGPS (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Agps en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Agps junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Agps tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AGPS.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Agps para la investigación de la señalización de AGPS, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Agps críticos para la función de AGPS
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Agps para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido AGPS CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido AGPS CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Agps. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AGPS (m) y el plásmido HDR AGPS (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Agps para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Agps definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.