ADAM9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418994

Übersicht

Adam9 kodiert ADAM9, eine membranverankerte Metalloprotease-Disintegrin, die das Ektodomänen-Shedding von Zelloberflächenproteinen vermittelt und zur Umgestaltung der extrazellulären Matrix beiträgt. Durch proteolytische Verarbeitung von Rezeptoren, Adhäsionsmolekülen und Vorstufen von Wachstumsfaktoren moduliert ADAM9 Signalnetzwerke wie EGFR/ErbB-assoziierte Signalwege, integrinabhängige Adhäsion und migratorische Antworten. In Mausmodellen wurde ADAM9 mit der Regulation von Entzündungen, Gewebeschädigungsantworten und tumorassoziierten Prozessen im Mikromilieu in Verbindung gebracht, was es für Studien zu Fibrose, Neuroinflammation und Krebsbiologie relevant macht. Seine Aktivität beeinflusst die Zell-Zell-Kommunikation und Proteasekaskaden, die epithel-stromale Interaktionen sowie das Trafficking von Immunzellen prägen.

Das ADAM9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Adam9-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Adam9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Adam9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAM9-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Adam9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAM9-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Adam9-Exone abzielen, die für die ADAM9-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Adam9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADAM9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom ADAM9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Adam9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAM9 HDR-Plasmid (m) und ADAM9 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Adam9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Adam9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.