Plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM22 (m): sc-418988
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ADAM22 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ADAM22, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ADAM22 Antibody (C-2): sc-373931
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM22 (m) | sc-418988 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Adam22 code pour ADAM22, une protéine transmembranaire de la famille ADAM dépourvue d’activité catalytique, enrichie dans le système nerveux, qui agit comme composant d’adhésion et d’échafaudage au niveau des synapses. ADAM22 forme des complexes avec LGI1 et des récepteurs postsynaptiques afin de réguler la transmission glutamatergique, la maturation synaptique et l’excitabilité neuronale, influençant l’organisation des épines dendritiques et la stabilité des circuits. Par ces interactions, ADAM22 module des voies de signalisation synaptique et une plasticité dépendante de l’activité, essentielles au neurodéveloppement et à l’homéostasie des réseaux. La dérégulation de l’axe ADAM22–LGI1 a été associée à une susceptibilité accrue aux crises et à des phénotypes neurodéveloppementaux, faisant d’Adam22 une cible pertinente pour des études mécanistiques de la dysfonction synaptique dans des modèles liés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM22 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Adam22 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Adam22, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Adam22 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ADAM22.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Adam22 pour l'étude de la signalisation de ADAM22, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Adam22 essentiels à la fonction de ADAM22
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Adam22 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ADAM22 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ADAM22 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Adam22. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ADAM22 plasmide HDR (m) et le ADAM22 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Adam22 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Adam22 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.