Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ACTG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400006-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTG1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACTG1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACTG1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACTG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:γ-Actin Anticorpo (1-17): sc-65638
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400006-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400006-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTG1 codifica a actina gama 1 citoplasmática, um componente central do citoesqueleto de actina que sustenta a forma celular, a tensão cortical e a geração de força. ACTG1 participa da polimerização e do remodelamento dos filamentos de actina que estão na base de processos como migração celular, adesão, citocinese e mecanotransdução, integrando-se à sinalização de GTPases da família Rho e a redes de proteínas ligantes de actina. Na biologia humana, perturbações na dinâmica do citoesqueleto dependente de ACTG1 podem alterar o tráfego intracelular e a arquitetura celular, tornando-o relevante para estudos de desenvolvimento tecidual e respostas ao estresse. Variações genéticas ou desregulação que afetem ACTG1 têm sido associadas a fenótipos ligados ao citoesqueleto, incluindo formas de deficiência auditiva neurossensorial e distúrbios que envolvem motilidade e estrutura celular alteradas.
ACTG1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACTG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACTG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACTG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACTG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.