ACSL1 Double Nickase Plasmid (m): sc-420278-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ACSL1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ACSL1 Double-Nickase-Plasmid (m) und ACSL1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Acsl1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ACSL1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-420278-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen *Acsl1* kodiert die Acyl-CoA-Synthetase der Langkettenfettsäure-Familie, Mitglied 1 (ACSL1), ein Enzym, das langkettige freie Fettsäuren in die entsprechenden Acyl‑CoA‑Thioester umwandelt – ein Schrittmacherschritt, der Lipide für nachgeschaltete Stoffwechselwege festlegt. ACSL1 unterstützt die mitochondriale β‑Oxidation, die Lipidspeicherung und das Lipid‑Remodelling sowie die allgemeine Energiehomöostase, indem es die Verfügbarkeit von Acyl‑CoA für Wege wie die Triglyceridsynthese, den Phospholipidumsatz und den Fettsäureabbau steuert. In metabolisch aktiven Geweben und im Kontext von Immunzellen beeinflusst die ACSL1‑Aktivität lipidvermittelte Signalwege und Entzündungsprogramme und verknüpft damit die Regulation von *Acsl1* mit metabolischen Stressantworten. Eine veränderte ACSL1‑Expression oder ‑Aktivität ist mit Phänotypen eines gestörten Lipidstoffwechsels assoziiert, die in Mausmodellen für Insulinresistenz, Steatose und kardiometabolische Erkrankungen relevant sind.
ACSL1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Acsl1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Acsl1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Acsl1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Acsl1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.