ACBD5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417183

Descripción general

ACBD5 codifica una proteína peroxisomal que contiene un dominio de unión a acil‑CoA y que favorece el manejo intracelular de lípidos al unirse a ésteres de acil‑CoA de cadena larga y coordinar el metabolismo lipídico asociado a los peroxisomas. Se localiza en la membrana del peroxisoma y contribuye a la comunicación entre el peroxisoma y otros orgánulos, influyendo en el tráfico de ácidos grasos y en la organización de las vías peroxisomales implicadas en la homeostasis lipídica. A través de su papel en la dinámica peroxisomal y el procesamiento de lípidos, ACBD5 es relevante para las respuestas al estrés celular vinculadas a cambios en la composición lipídica y a la disfunción de orgánulos. La desregulación del metabolismo lipídico dependiente de peroxisomas se estudia con frecuencia en el contexto de la neurodegeneración, los desequilibrios metabólicos y la señalización inflamatoria, lo que convierte a ACBD5 en una diana útil para investigaciones mecanísticas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACBD5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ACBD5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ACBD5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ACBD5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACBD5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ACBD5 para la investigación de la señalización de ACBD5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ACBD5 críticos para la función de ACBD5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ACBD5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ACBD5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ACBD5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ACBD5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACBD5 (h) y el plásmido HDR ACBD5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ACBD5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ACBD5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.