Plásmido Doble Nickase (m) Abi-2: sc-435933-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Abi-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Abi-2 (m) y el plásmido de doble nickasa Abi-2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Abi2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Abi-2 Anticuerpo (B-3): sc-393982
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Abi-2 | sc-435933-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Abi2 del ratón codifica Abelson interactor 2 (Abi-2), una proteína adaptadora que regula la remodelación del citoesqueleto de actina y la transducción de señales aguas abajo de receptores tirosina quinasa y de pequeñas GTPasas. Abi-2 actúa dentro de complejos multiproteicos, como los ensamblajes reguladores WAVE, para coordinar la polimerización de actina dependiente de Arp2/3, influyendo en la formación de lamelipodios, la adhesión celular y la migración dirigida. A través de estas vías, Abi-2 contribuye a la morfogénesis neuronal, el tráfico de células inmunitarias y la dinámica epitelial, y la actividad alterada de redes vinculadas a Abi2 se ha asociado con proliferación desregulada y fenotipos invasivos en modelos relevantes para enfermedades. Por lo tanto, Abi2 es un nodo útil para estudiar la señalización del citoesqueleto, la dinámica de las protrusiones de membrana y el crosstalk entre vías que da forma al comportamiento celular.
Abi-2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Abi2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Abi2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Abi2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Abi2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.