ABCF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406271

Übersicht

ABCF2 (ATP-binding cassette subfamily F member 2) ist eine lösliche ATPase der ABC-Familie, der Transmembrandomänen fehlen und die im Zytosol als Regulator der Translation und ribosomenassoziierter Prozesse wirkt. Es wurde mit der Kontrolle der Proteinsynthese unter zellulärem Stress in Verbindung gebracht und kann die Proteostase beeinflussen, indem es Interaktionen mit der Translationsmaschinerie moduliert. Über diese Funktionen ist ABCF2 relevant für Signalwege, die Zellwachstum, Stressanpassung und entzündliche Signalantworten infolge veränderter Translationskontrolle prägen. Eine Dysregulation der ABCF2-Expression wurde bei Krebs und in weiteren pathophysiologischen Kontexten beschrieben, in denen translationales Remodeling und Stressantwortprogramme gestört sind.

Das ABCF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ABCF2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ABCF2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ABCF2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ABCF2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ABCF2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ABCF2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ABCF2-Exone abzielen, die für die ABCF2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ABCF2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ABCF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ABCF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ABCF2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ABCF2 HDR-Plasmid (h) und ABCF2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ABCF2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ABCF2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.