Plásmido Doble Nickase (h) ABCA3: sc-402388-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ABCA3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ABCA3 (h) y el plásmido de doble nickasa ABCA3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ABCA3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ABCA3 | sc-402388-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ABCA3 | sc-402388-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA3 codifica un transportador de la familia ABC (ATP-binding cassette) que se localiza en los cuerpos lamelares de las células epiteliales alveolares tipo II, donde utiliza la hidrólisis de ATP para impulsar la translocación de fosfolípidos necesaria para la maduración y el almacenamiento del surfactante pulmonar. Al regular la biogénesis de los cuerpos lamelares, el tráfico vesicular y la homeostasis lipídica, ABCA3 favorece la estabilidad alveolar y un intercambio gaseoso eficiente. La alteración de la función de ABCA3 se asocia con un metabolismo del surfactante deficiente y se estudia ampliamente en el contexto de fenotipos de enfermedad pulmonar intersticial hereditaria y adquirida. Como transportador de membrana con expresión restringida a tipos celulares específicos, ABCA3 también se utiliza como modelo para investigar la proteostasis, el control de calidad del retículo endoplásmico (RE) y las vías de transporte de lípidos en la biología epitelial.
ABCA3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABCA3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABCA3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABCA3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABCA3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.