Plasmide Double Nickase (h) ABCA2: sc-405934-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABCA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABCA2 Double Nickase (h) et le plasmide ABCA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABCA2 | sc-405934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABCA2 | sc-405934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA2 code un transporteur de la famille des cassettes de liaison à l’ATP (ABC), localisé principalement au niveau des membranes endolysosomales, où il contribue au métabolisme intracellulaire des lipides et au maintien de l’homéostasie membranaire. En couplant l’hydrolyse de l’ATP au transport de substrats, ABCA2 influence le trafic du cholestérol et des sphingolipides, la dynamique vésiculaire et, plus largement, des voies de protéostasie en interaction avec les fonctions endocytaires et lysosomales. Des modifications de l’expression d’ABCA2 ont été associées à des processus pertinents pour la neurobiologie et à une dérégulation lipidique, et ce gène est fréquemment étudié dans des contextes où la composition membranaire affecte la signalisation et les réponses cellulaires au stress. En tant que grand transporteur multipasse, ABCA2 sert également de modèle pour étudier la régulation des transporteurs ABC, leur localisation subcellulaire et les conséquences des perturbations du transport lipidique.
ABCA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.