Plasmide Double Nickase (h) 6CKine: sc-403041-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) 6CKine correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide 6CKine Double Nickase (h) et le plasmide 6CKine Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCL21. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) 6CKine | sc-403041-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) 6CKine | sc-403041-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCL21 code la chimiokine 6CKine, une chimiokine CC homéostatique qui se lie à CCR7 afin d’orienter, par chimiotactisme, les lymphocytes T naïfs, les lymphocytes T mémoire centrale et les cellules dendritiques matures vers les vaisseaux lymphatiques et les organes lymphoïdes secondaires. Via une signalisation dépendante de CCR7, CCL21 contribue au trafic des cellules immunitaires, à l’organisation des tissus lymphoïdes et à la coordination de la présentation de l’antigène et de l’amorçage de l’immunité adaptative. Une activité dérégulée de l’axe CCL21–CCR7 a été associée à une infiltration leucocytaire modifiée, à des microenvironnements inflammatoires chroniques et à des mécanismes pertinents pour le contexte immunitaire tumoral et les schémas de dissémination métastatique. En tant que chimiokine lymphoïde, CCL21 est fréquemment étudiée pour ses rôles dans l’orientation immunitaire associée à la lymphangiogenèse et dans les interactions stroma–immunité au sein des tissus.
6CKine Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCL21 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCL21. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCL21. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCL21.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.