Plásmido Doble Nickase (h) 53BP2: sc-403004-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)53BP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa 53BP2 (h) y el plásmido de doble nickasa 53BP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TP53BP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: 53BP2 Anticuerpo (H-4): sc-398311
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) 53BP2 | sc-403004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) 53BP2 | sc-403004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP53BP2 codifica 53BP2 (también conocida como ASPP2), un adaptador rico en prolina que se une al dominio de unión al ADN de p53 y modula programas transcripcionales que regulan la apoptosis, el control del ciclo celular y las respuestas al estrés. Mediante interacciones con miembros de la familia de p53 y con componentes de complejos citoesqueléticos y de unión celular, 53BP2 conecta la vigilancia del genoma con la polaridad celular y las señales de supervivencia. Participa en vías relacionadas con la respuesta al daño del ADN, la señalización apoptótica y la regulación de salidas transcripcionales que influyen en la aptitud celular. La desregulación de la expresión o la función de TP53BP2 se ha asociado con una actividad alterada de la vía de p53 y se estudia en el contexto de la biología tumoral, la inestabilidad genómica y defectos en la muerte celular programada.
53BP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TP53BP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TP53BP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TP53BP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TP53BP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.