Plasmide Double Nickase (h) 5α-Reductase 1: sc-402151-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) 5α-Reductase 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide 5α-Reductase 1 Double Nickase (h) et le plasmide 5α-Reductase 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SRD5A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) 5α-Reductase 1 | sc-402151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) 5α-Reductase 1 | sc-402151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SRD5A1 code la 5α-réductase 1 humaine, une oxydoréductase dépendante du NADPH, localisée principalement au réticulum endoplasmique, qui catalyse la conversion de la testostérone en dihydrotestostérone et participe plus largement au métabolisme des stéroïdes. En régulant les niveaux locaux d’androgènes, SRD5A1 influence la signalisation du récepteur des androgènes et les programmes transcriptionnels en aval qui façonnent la différenciation cellulaire, la prolifération et l’homéostasie tissulaire. Des altérations de l’expression ou de l’activité de SRD5A1 ont été étudiées dans des contextes endocriniens et métaboliques, ainsi que dans la biologie des maladies sensibles aux androgènes, notamment les troubles de l’équilibre stéroïdien et des modèles tumoraux hormonodépendants. Ainsi, SRD5A1 est fréquemment analysé afin de disséquer le flux stéroïdogénique, les interactions (crosstalk) de la signalisation androgénique et la régulation génique spécifique au contexte dans des cellules humaines.
5α-Reductase 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SRD5A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SRD5A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SRD5A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SRD5A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.