Plasmide Double Nickase (m) β ig-h3: sc-423369-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) β ig-h3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide β ig-h3 Double Nickase (m) et le plasmide β ig-h3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tgfbi. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) β ig-h3 | sc-423369-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tgfbi code la β ig-h3 (TGFBI), une protéine sécrétée de la matrice extracellulaire induite par la signalisation du TGF-β, qui module l’adhérence cellule–matrice, la migration et le remodelage tissulaire via des interactions avec les intégrines et des composants structuraux de la matrice. Dans les systèmes murins, la β ig-h3 contribue à l’organisation de la matrice extracellulaire, à des processus associés à la réparation des plaies et à la régulation du comportement des cellules épithéliales et stromales, ce qui la relie à des voies telles que la signalisation des adhérences focales et les réponses fibrosantes induites par le TGF-β. Une expression altérée de TGFBI ou des changements de dépôt matriciel sont fréquemment étudiés dans des contextes de remodelage pathologique, notamment des phénotypes de type fibrotique et des modifications du microenvironnement tumoral, où la composition de la MEC peut influencer l’invasion et le trafic des cellules immunitaires. Ces caractéristiques font de Tgfbi une cible utile pour disséquer la manière dont les protéines de la MEC régulées par le TGF-β façonnent l’architecture tissulaire et la mécanobiologie.
β ig-h3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tgfbi dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tgfbi. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tgfbi. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tgfbi.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.