β ig-h3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403770

Descripción general

TGFBI codifica β ig-h3 (TGFBIp), una proteína de la matriz extracelular inducida por la señalización de TGF-β que se une a colágenos, fibronectina e integrinas para regular la adhesión celular, la migración y la organización de la matriz. A través de sus funciones en la remodelación de la MEC y en la señalización mediada por integrinas, β ig-h3 influye en la transición epitelio-mesenquimatosa, la reparación de heridas y la homeostasis tisular. La alteración de la expresión de TGFBI se ha vinculado a procesos fibróticos y a interacciones tumor-estroma que afectan la invasión y el potencial metastásico. Las variantes patogénicas y el depósito desregulado de β ig-h3 también se asocian con distrofias del estroma corneal y con una agregación proteica aberrante en tejidos oculares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO β ig-h3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TGFBI en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TGFBI junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TGFBI tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína β ig-h3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TGFBI para la investigación de la señalización de β ig-h3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TGFBI críticos para la función de β ig-h3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TGFBI para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido β ig-h3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido β ig-h3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TGFBI. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR β ig-h3 (h) y el plásmido HDR β ig-h3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TGFBI para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TGFBI definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.