α2C-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419025
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α2C-AR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α2C-AR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α2C-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419025 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adra2c codifica o receptor α2C-AR de camundongo, um receptor acoplado à proteína G inibitório para catecolaminas, que se acopla principalmente a Gi/Go para suprimir a atividade da adenilil ciclase, reduzir a sinalização de cAMP/PKA e modular a função de canais iônicos. Por meio da regulação da liberação presináptica de neurotransmissores e do fluxo simpático, o α2C-AR influencia a transmissão sináptica, o tônus vascular e a sinalização neuroendócrina responsiva ao estresse. A ativação do receptor também pode acionar vias dependentes de βγ que afetam a sinalização MAPK/ERK e a excitabilidade celular. A desregulação da sinalização adrenérgica envolvendo ADRA2C tem sido associada a fenótipos neuropsiquiátricos e a processos cardiovasculares, tornando esse gene relevante para estudos de regulação autonômica e função de circuitos neurais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α2C-AR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adra2c em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adra2c, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adra2c na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α2C-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adra2c para a investigação da sinalização de α2C-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adra2c críticos para a função α2C-AR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adra2c para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α2C-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo α2C-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adra2c. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α2C-AR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR α2C-AR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adra2c para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adra2c definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.