α2C-AR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419025
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- α2C-AR El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico α2C-AR, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
α2C-AR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419025 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Adra2c codifica el receptor α2C-AR del ratón, un receptor acoplado a proteína G inhibitoria para catecolaminas que se acopla principalmente a Gi/Go para suprimir la actividad de la adenilato ciclasa, reducir la señalización de cAMP/PKA y modular la función de los canales iónicos. Mediante la regulación de la liberación presináptica de neurotransmisores y del flujo simpático, el α2C-AR influye en la transmisión sináptica, el tono vascular y la señalización neuroendocrina sensible al estrés. La activación del receptor también puede activar vías dependientes de βγ que afectan la señalización MAPK/ERK y la excitabilidad celular. La señalización adrenérgica desregulada que involucra a ADRA2C se ha asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y procesos cardiovasculares, lo que hace que este gen sea relevante para estudios de la regulación autonómica y la función de los circuitos neuronales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO α2C-AR (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adra2c en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adra2c junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adra2c tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína α2C-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adra2c para la investigación de la señalización de α2C-AR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adra2c críticos para la función de α2C-AR
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adra2c para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido α2C-AR CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido α2C-AR CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adra2c. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR α2C-AR (m) y el plásmido HDR α2C-AR (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adra2c para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adra2c definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.