Plasmide Double Nickase (m) α1B-AR: sc-419020-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) α1B-AR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α1B-AR Double Nickase (m) et le plasmide α1B-AR Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Adra1b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) α1B-AR | sc-419020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) α1B-AR | sc-419020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adra1b code le récepteur adrénergique α1B murin (α1B-AR), un récepteur couplé aux protéines G des catécholamines, qui se couple principalement à Gq/11 pour activer la phospholipase Cβ, augmentant la signalisation IP3/DAG, la mobilisation du Ca2+ intracellulaire et l’activité de la protéine kinase C. Par ces voies, il régule le tonus du muscle lisse vasculaire, l’excitabilité cardiaque et neuronale, ainsi que la modulation de la libération de neurotransmetteurs, en intégrant les signaux sympathiques avec les cascades MAPK/ERK et d’autres voies de kinases. La signalisation de l’α1B-AR influence des programmes transcriptionnels liés à la croissance cellulaire et aux réponses au stress, et une altération de la fonction des récepteurs adrénergiques a été associée à des phénotypes pertinents pour l’hypertension, le remodelage cardiaque et la régulation neurocomportementale. Les modèles murins Adra1b permettent donc des études mécanistiques de la signalisation adrénergique dans des contextes cardiovasculaires et du système nerveux.
α1B-AR Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Adra1b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Adra1b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Adra1b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Adra1b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.