Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) α-FR: sc-400909-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α-FR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α-FR (h) y el plásmido de doble nickasa α-FR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FOLR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α-FR | sc-400909-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) α-FR | sc-400909-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOLR1 codifica el receptor alfa del folato (α-FR), una proteína de superficie celular anclada por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que se une a los folatos con alta afinidad y favorece el metabolismo celular de un carbono al facilitar la captación de folato. Mediante la regulación de la disponibilidad intracelular de folato, el α-FR influye en la biosíntesis de nucleótidos, las reacciones de metilación y la homeostasis redox, lo que lo vincula con la proliferación y el estado metabólico en tejidos epiteliales. La expresión de FOLR1 se altera con frecuencia en cánceres con características de linaje epitelial y también es relevante para procesos del desarrollo y neurobiológicos dependientes del folato. Como receptor de membrana con tráfico endocítico, el α-FR constituye un punto accesible para estudiar el transporte de nutrientes, el reciclaje de receptores y la adaptación metabólica en modelos celulares humanos.
α-FR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FOLR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FOLR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FOLR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FOLR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.