Plasmide CRISPR/Cas9 KO α Enolase (m): sc-420178
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- α Enolase Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique α Enolase, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: α Enolase Antibody (9): sc-101513
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO α Enolase (m) | sc-420178 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Eno1 code l’α-énolase, une métallœnzyme conservée qui catalyse la conversion du 2‑phosphoglycérate en phosphoénolpyruvate au cours de la glycolyse, soutenant la production d’ATP et le flux de carbone dans diverses conditions nutritives. Au-delà de son rôle métabolique canonique, ENO1 contribue à une reprogrammation métabolique plus large et peut influencer l’équilibre rédox, l’adaptation à l’hypoxie et les réponses au stress cellulaire via son impact sur le débit glycolytique. Des modifications de l’expression et de l’activité d’ENO1 ont été associées à des phénotypes prolifératifs et inflammatoires, et la protéine est fréquemment étudiée dans des contextes où le métabolisme énergétique croise la signalisation oncogénique et la fonction des cellules immunitaires. Dans les systèmes murins, Eno1 constitue un nœud expérimental commode pour disséquer les mécanismes liés à la glycolyse qui façonnent la croissance cellulaire, la migration et les réponses aux signaux du microenvironnement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO α Enolase (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Eno1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Eno1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Eno1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine α Enolase.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Eno1 pour l'étude de la signalisation de α Enolase, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Eno1 essentiels à la fonction de α Enolase
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Eno1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le α Enolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le α Enolase plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Eno1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le α Enolase plasmide HDR (m) et le α Enolase (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Eno1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Eno1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.