α-2 antiplasmin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403792

Visão geral

SERPINF2 codifica a α-2 antiplasmina humana, um inibidor circulante de serinoproteases que é o principal inibidor fisiológico da plasmina e um regulador-chave da fibrinólise. Ao formar complexos estáveis com a plasmina e ao ser entrecruzada na fibrina pelo fator XIIIa, a α-2 antiplasmina limita a degradação do coágulo de fibrina e ajuda a equilibrar a coagulação e a proteólise extracelular. Essa atividade conecta o SERPINF2 ao sistema de ativação do plasminogênio, à remodelação da fibrina e a efeitos subsequentes sobre a renovação da matriz e a homeostase vascular. Alterações na função ou na expressão de SERPINF2 têm sido associadas a uma capacidade fibrinolítica desregulada e são estudadas no contexto de fenótipos de sangramento e trombose, bem como em cenários inflamatórios e de remodelação tecidual em que a atividade da plasmina é relevante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α-2 antiplasmin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SERPINF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SERPINF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SERPINF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α-2 antiplasmin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SERPINF2 para a investigação da sinalização de α-2 antiplasmin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SERPINF2 críticos para a função α-2 antiplasmin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SERPINF2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo α-2 antiplasmin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo α-2 antiplasmin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SERPINF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo α-2 antiplasmin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR α-2 antiplasmin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SERPINF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SERPINF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.