α-2 antiplasmin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403792

Descripción general

SERPINF2 codifica la α-2 antiplasmina humana, un inhibidor circulante de serinproteasas que constituye el principal inhibidor fisiológico de la plasmina y un regulador clave de la fibrinólisis. Al formar complejos estables con la plasmina y quedar entrecruzada en la fibrina por el factor XIIIa, la α-2 antiplasmina limita la degradación del coágulo de fibrina y ayuda a equilibrar la coagulación y la proteólisis extracelular. Esta actividad vincula a SERPINF2 con el sistema de activación del plasminógeno, la remodelación de la fibrina y los efectos posteriores sobre el recambio de la matriz y la homeostasis vascular. Las alteraciones en la función o la expresión de SERPINF2 se han asociado con una capacidad fibrinolítica desregulada y se estudian en el contexto de fenotipos de sangrado y trombosis, así como en escenarios inflamatorios y de remodelación tisular donde la actividad de la plasmina es determinante.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO α-2 antiplasmin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SERPINF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SERPINF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SERPINF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína α-2 antiplasmin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SERPINF2 para la investigación de la señalización de α-2 antiplasmin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SERPINF2 críticos para la función de α-2 antiplasmin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SERPINF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SERPINF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR α-2 antiplasmin (h) y el plásmido HDR α-2 antiplasmin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SERPINF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SERPINF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.