Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
α1a Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400022
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1a Tubulin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α1a Tubulin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1a Tubulin Anticorpo (7-RY28): sc-134237
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1a Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400022 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TUBA1A codifica a tubulina α1a, um isotipo central de α-tubulina que forma heterodímeros com a β-tubulina para montar microtúbulos, sustentando a arquitetura do citoesqueleto, o transporte intracelular e a função do fuso mitótico. A dinâmica dos microtúbulos, governada pela composição de α/β-tubulina e por proteínas associadas, coordena processos como migração neuronal, orientação axonal e tráfego vesicular. O TUBA1A é enriquecido no sistema nervoso em desenvolvimento, e alterações na polimerização ou na estabilidade dos microtúbulos podem perturbar programas de desenvolvimento cortical. Variações patogênicas em TUBA1A estão associadas a tubulinopatias e a transtornos do neurodesenvolvimento caracterizados por malformações do desenvolvimento cortical e conectividade neuronal prejudicada.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α1a Tubulin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TUBA1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TUBA1A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TUBA1A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α1a Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TUBA1A para a investigação da sinalização de α1a Tubulin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TUBA1A críticos para a função α1a Tubulin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TUBA1A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α1a Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo α1a Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TUBA1A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α1a Tubulin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR α1a Tubulin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TUBA1A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TUBA1A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.