8430426H19Rik Ativadores

Os activadores comuns da 8430426H19Rik incluem, entre outros, a forskolina CAS 66575-29-9, a isonomia CAS 56092-82-1, o PMA CAS 16561-29-8, o ácido retinóico, todos os trans CAS 302-79-4 e o monofosfato de adenosina 3',5'-cíclico CAS 60-92-4.

8430426H19Rik Activators é uma classificação química atribuída a compostos que aumentam a expressão do gene 8430426H19Rik. A descoberta e a validação destes activadores implicam uma abordagem experimental em duas vertentes. Inicialmente, é utilizado o rastreio de alto rendimento (HTS) para analisar extensas bibliotecas químicas em busca de compostos activos. Esta técnica utiliza um ensaio de gene repórter, um método em que um gene repórter, capaz de emitir um sinal detetável, como a fluorescência ou a luminescência, é colocado sob o controlo do promotor do gene 8430426H19Rik. Quando as células que contêm esta construção repórter interagem com vários compostos químicos, os compostos que podem ativar o promotor levam a um aumento do sinal repórter. Esta amplificação do sinal serve como um indicador da capacidade do composto para aumentar a expressão do gene.

A fase subsequente envolve a utilização de PCR quantitativo (qPCR) para quantificar com precisão a quantidade de ARNm 8430426H19Rik nas células. Um aumento dos níveis de ARNm detectado por qPCR indicaria que os compostos podem efetivamente estimular a transcrição do gene. No entanto, para garantir que o aumento do ARNm se traduz num aumento correspondente dos níveis de proteína, é utilizada a análise Western blot. A presença de uma banda proteica mais pronunciada, em comparação com as amostras de controlo, confirma que o composto tem a capacidade de afetar o gene não só ao nível da transcrição, mas também ao nível da tradução, culminando num aumento da proteína real.