O processo de identificação destes activadores começa com uma abordagem meticulosa que envolve o rastreio de alto rendimento (HTS). Nesta fase, extensas bibliotecas de entidades químicas são meticulosamente testadas em ensaios celulares concebidos para detetar a regulação positiva da atividade do gene. Estes ensaios são engenhosamente construídos ligando o promotor do gene a um sistema repórter, como marcadores fluorescentes ou luminescentes, que podem indicar os níveis de expressão do gene. Um composto que possa ativar o gene 2010309E21Rik conduzirá a um aumento do sinal do repórter, tornando possível quantificar o grau de ativação. Após a identificação de potenciais activadores através de HTS, estes são submetidos a ensaios de validação rigorosos para verificar a sua especificidade e eficácia na regulação positiva do gene 2010309E21Rik. A reação quantitativa em cadeia da polimerase (qPCR) é utilizada para medir os níveis de ARNm do gene após a interação com estes compostos químicos, fornecendo dados quantitativos sobre a sua influência na expressão do gene na fase de transcrição. Uma elevação significativa dos níveis de mRNA após a aplicação é indicativa de ativação transcricional.
Além disso, o impacto da ativação na síntese proteica é avaliado utilizando a técnica Western blot. Este método permite a deteção e a quantificação da proteína codificada pelo gene 2010309E21Rik. Um aumento concordante dos níveis de mRNA e de proteína após a interação com um composto é uma confirmação convincente do papel do composto como ativador. Estes métodos de validação não são apenas cruciais para confirmar os resultados da HTS inicial, mas também fornecem uma compreensão detalhada do mecanismo pelo qual estes activadores exercem o seu efeito na expressão do gene.
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| Nome do Produto | CAS # | Numero de Catalogo | Quantidade | Preco | Uso e aplicacao | NOTAS |
|---|---|---|---|---|---|---|
Ionomycin, free acid | 56092-81-0 | sc-263405 sc-263405A | 1 mg 5 mg | $94.00 $259.00 | 2 | |
A ionomicina é um ionóforo de cálcio que aumenta as concentrações de cálcio intracelular. Esta elevação do cálcio pode ativar proteínas quinases dependentes do cálcio ou outras proteínas de ligação ao cálcio, o que poderia indiretamente aumentar a atividade do 2010309E21Rik se este for dependente do cálcio. | ||||||
PMA | 16561-29-8 | sc-3576 sc-3576A sc-3576B sc-3576C sc-3576D | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg 100 mg | $40.00 $129.00 $210.00 $490.00 $929.00 | 119 | |
O PMA é um análogo do diacilglicerol (DAG) que ativa a proteína quinase C (PKC). A PKC fosforila as proteínas alvo, o que pode levar ao aumento da atividade da 2010309E21Rik se esta for regulada por fosforilação mediada por PKC. | ||||||
Retinoic Acid, all trans | 302-79-4 | sc-200898 sc-200898A sc-200898B sc-200898C | 500 mg 5 g 10 g 100 g | $65.00 $319.00 $575.00 $998.00 | 28 | |
O ácido retinóico actua ligando-se aos seus receptores nucleares (RARs e RXRs), que regulam a expressão genética. Se o 2010309E21Rik estiver sob o controlo regulador dos genes que respondem ao ácido retinóico, a sua atividade poderá ser indiretamente reforçada. | ||||||
Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate | 60-92-4 | sc-217584 sc-217584A sc-217584B sc-217584C sc-217584D sc-217584E | 100 mg 250 mg 5 g 10 g 25 g 50 g | $114.00 $175.00 $260.00 $362.00 $617.00 $1127.00 | ||
O Dibutiril AMPc é um análogo do AMPc permeável às células que ativa a PKA. Esta ativação pode levar à fosforilação de proteínas e potencialmente aumentar a atividade da 2010309E21Rik se esta for um substrato da PKA. | ||||||
(−)-Epigallocatechin Gallate | 989-51-5 | sc-200802 sc-200802A sc-200802B sc-200802C sc-200802D sc-200802E | 10 mg 50 mg 100 mg 500 mg 1 g 10 g | $42.00 $72.00 $124.00 $238.00 $520.00 $1234.00 | 11 | |
Sabe-se que o EGCG inibe determinadas proteínas cinases. Se a 2010309E21Rik for regulada negativamente por uma quinase que é inibida pela EGCG, a sua atividade poderá ser indiretamente reforçada pela redução da fosforilação inibitória. | ||||||
D-erythro-Sphingosine-1-phosphate | 26993-30-6 | sc-201383 sc-201383D sc-201383A sc-201383B sc-201383C | 1 mg 2 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $162.00 $316.00 $559.00 $889.00 $1693.00 | 7 | |
O S1P ativa os receptores S1P, que podem desencadear cascatas de sinalização intracelular, incluindo a via PI3K/Akt. Se a atividade da 2010309E21Rik for reforçada pela sinalização PI3K/Akt, a S1P poderá aumentar indiretamente a sua atividade. | ||||||
LY 294002 | 154447-36-6 | sc-201426 sc-201426A | 5 mg 25 mg | $121.00 $392.00 | 148 | |
O LY294002 é um inibidor da PI3K. Se a 2010309E21Rik fizer parte de uma cascata de sinalização que é regulada negativamente pela atividade da PI3K, a inibição por LY294002 poderá eliminar esta regulação negativa e aumentar a atividade da 2010309E21Rik. | ||||||
Oligomycin A | 579-13-5 | sc-201551 sc-201551A sc-201551B sc-201551C sc-201551D | 5 mg 25 mg 100 mg 500 mg 1 g | $175.00 $600.00 $1179.00 $5100.00 $9180.00 | 26 | |
A oligomicina inibe a ATP sintase, conduzindo a um aumento do ADP intracelular. Se a 2010309E21Rik necessitar de ADP ou for regulada por sensores do estado energético celular, a oligomicina poderá aumentar indiretamente a atividade da 2010309E21Rik. | ||||||
Zinc | 7440-66-6 | sc-213177 | 100 g | $47.00 | ||
O cloreto de zinco pode modular a atividade de várias proteínas de dedo de zinco e metaloenzimas. Se a 2010309E21Rik possuir um domínio de ligação ao zinco ou for regulada por proteínas sensíveis ao zinco, o ZnCl2 pode aumentar a sua atividade. | ||||||
NAD+, Free Acid | 53-84-9 | sc-208084B sc-208084 sc-208084A sc-208084C sc-208084D sc-208084E sc-208084F | 1 g 5 g 10 g 25 g 100 g 1 kg 5 kg | $56.00 $186.00 $296.00 $655.00 $2550.00 $3500.00 $10500.00 | 4 | |
O NAD+ é uma coenzima envolvida em reacções redox. Se a 2010309E21Rik fizer parte de vias reguladas pelo rácio NAD+/NADH ou se tiver atividade de ADP-ribosiltransferase, o NAD+ poderá aumentar a sua atividade. | ||||||