ZNF322A Double Nickase Plasmid (h): sc-417187-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ZNF322A Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ZNF322A Double-Nickase-Plasmid (h) und ZNF322A Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ZNF322 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ZNF322A Double Nickase Plasmid (h) | sc-417187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZNF322A Double Nickase Plasmid (h2) | sc-417187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF322 (ZNF322A) kodiert einen menschlichen C2H2-Zinkfinger-Transkriptionsfaktor mit KRAB-Domäne, der an sequenzspezifischer DNA-Bindung und an transkriptionellen Repressionsprogrammen beteiligt ist, die den Zellzustand sowie stressresponsive Genexpression prägen. Berichtetet Funktionen verknüpfen ZNF322A mit der Regulation von Proliferations-, Überlebens- und Motilitäts-assoziierten transkriptionellen Netzwerken, was zu Rollen in der chromatinassoziierten Kontrolle nachgeschalteter Signalwege passt. Eine fehlregulierte ZNF322A-Expression wurde in mehreren Kontexten mit onkogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter veränderte Epithelprogramme und Invasions-signaturen. Als nukleäres Regulationsprotein ist es ein nützliches Ziel, um transkriptionelle Schaltkreise, chromatinabhängige Genkontrolle und das Umverdrahten von Signalwegen in krankheitsrelevanten Modellen zu untersuchen.
ZNF322A Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ZNF322-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ZNF322 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ZNF322-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ZNF322-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.