ZNF263 Double Nickaseプラスミド (h): sc-411418-NIC

ZNF263は、KRABドメインを含むC2H2型ジンクフィンガー転写因子をコードしており、特定のDNAモチーフに結合して、クロマチン構造化や転写抑制に関連する遺伝子発現プログラムを制御します。KRAB関連コリプレッサー複合体やエピジェネティック修飾因子との相互作用を介して、ZNF263はプロモーターおよびエンハンサー活性の制御に関与し、細胞周期の進行、分化、ゲノム安定性に影響を与えます。ZNF263の機能変化や発現制御の破綻は、がん関連経路や発生制御の異常を含む複数の疾患状況で観察される転写ネットワークの再編成と関連づけられています。配列特異的な制御因子として、ZNF263は制御ネットワークのマッピング、直接的なゲノム標的の同定、エピジェネティック制御機構の解明のために、しばしば研究対象となっています。

ZNF263 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ZNF263 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ZNF263内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ZNF263の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ZNF263が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。