ZNF263 Plasmide Double Nickase (h): sc-411418-NIC

ZNF263 codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco C2H2 contenente un dominio KRAB, in grado di legarsi a specifici motivi del DNA per regolare programmi di espressione genica legati all’organizzazione della cromatina e alla repressione trascrizionale. Attraverso interazioni con il macchinario corepressore associato a KRAB e con modificatori epigenetici, ZNF263 contribuisce al controllo dell’attività di promotori ed enhancer, influenzando la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e la stabilità del genoma. Un’attività alterata di ZNF263 o una sua espressione deregolata è stata associata al rimodellamento trascrizionale osservato in molteplici contesti patologici, inclusi percorsi correlati al cancro e un’errata regolazione dello sviluppo. In quanto regolatore sequenza-specifico, ZNF263 viene spesso studiato per mappare reti regolatorie, identificare bersagli genomici diretti e analizzare i meccanismi di controllo epigenetico.

ZNF263 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF263 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF263. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF263. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF263 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.