ZNF101 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413991

Visão geral

ZNF101 codifica uma proteína do tipo dedo de zinco C2H2, com função prevista como reguladora da transcrição por ligação ao DNA de maneira específica à sequência. Como parte de redes de fatores de transcrição com dedos de zinco, espera-se que ZNF101 contribua para o controle da expressão gênica associado à cromatina, influenciando programas que determinam a identidade celular, a proliferação e as respostas ao estresse. A perturbação da regulação transcricional mediada por dedos de zinco é frequentemente associada a estados epigenéticos desregulados e a fenótipos oncogênicos ou do desenvolvimento, tornando ZNF101 relevante para estudos mecanísticos dos circuitos regulatórios gênicos. Assim, o ZNF101 humano é de interesse para mapear vias de controle transcricional e identificar funções dependentes do contexto na homeostase celular e em assinaturas de expressão gênica associadas a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZNF101 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZNF101 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZNF101, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZNF101 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZNF101.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZNF101 para a investigação da sinalização de ZNF101, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZNF101 críticos para a função ZNF101
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZNF101 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZNF101 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ZNF101 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZNF101. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZNF101 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ZNF101 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZNF101 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZNF101 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.