Plásmido Doble Nickase (h) ZC3H4: sc-411693-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZC3H4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZC3H4 (h) y el plásmido de doble nickasa ZC3H4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZC3H4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZC3H4 | sc-411693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZC3H4 | sc-411693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZC3H4 codifica una proteína de unión a ARN con dedo de zinc tipo CCCH implicada en el metabolismo nuclear del ARN y el control de la transcripción. La evidencia actual vincula a ZC3H4 con la regulación de la terminación de la transcripción por la ARN polimerasa II y con el procesamiento de transcritos nacientes, influyendo en los programas de expresión génica y en la vigilancia del ARN nuclear. Al modular el destino del ARN en la interfaz cromatina–ARN, ZC3H4 puede afectar vías que controlan transiciones de estado celular, respuestas al estrés y proliferación. La regulación alterada de la terminación transcripcional y del procesamiento de ARN se observa con frecuencia en el cáncer y en otros trastornos de la expresión génica, lo que convierte a ZC3H4 en una diana útil para estudios mecanísticos de estos procesos.
ZC3H4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZC3H4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZC3H4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZC3H4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZC3H4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.