Plasmide Double Nickase (h) YME1L1: sc-409793-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) YME1L1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide YME1L1 Double Nickase (h) et le plasmide YME1L1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant YME1L1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) YME1L1 | sc-409793-NIC | 20 µg | $410.00 |
YME1L1 code une métalloprotéase AAA+ dépendante de l’ATP, localisée dans la membrane interne mitochondriale, qui soutient la protéostasie mitochondriale en dégradant les protéines mal repliées ou en excès associées à la membrane, et en régulant le renouvellement de facteurs clés de la chaîne respiratoire ainsi que de protéines impliquées dans le remodelage membranaire. En assurant le contrôle qualité de la membrane interne et le remodelage de complexes protéiques, YME1L1 contribue à l’efficacité de la phosphorylation oxydative, à la dynamique mitochondriale et à des voies de signalisation sensibles au stress liées au maintien de l’homéostasie bioénergétique. L’altération de la fonction de YME1L1 a été associée à des phénotypes de dysfonction mitochondriale, notamment une architecture des crêtes modifiée, une respiration diminuée et une sensibilité accrue au stress protéotoxique. Ces caractéristiques font de YME1L1 une cible pertinente pour étudier les mécanismes de maintenance mitochondriale et des voies impliquées dans la neurodégénérescence et d’autres troubles liés aux mitochondries.
YME1L1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus YME1L1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de YME1L1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de YME1L1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de YME1L1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.