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XBP1双切口酶质粒(m) | sc-423727-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
XBP1双切口酶质粒(m2) | sc-423727-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Xbp1 编码 XBP1,这是一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,是由 IRE1α 介导的 mRNA 剪接下游、未折叠蛋白反应(UPR)的核心效应分子。活化的 XBP1 启动一系列转录程序,以增强内质网的蛋白折叠能力、调控内质网相关降解(ERAD),并重塑脂质生物合成,从而在分泌应激条件下恢复蛋白稳态。在小鼠系统中,XBP1 常被用于研究专业分泌细胞的分化与功能、代谢适应,以及在长期内质网应激组织中炎症信号的串扰。XBP1 活性失调已在代谢性疾病、神经退行性变和免疫介导的病理模型中被认为与持续的 UPR 信号及细胞因子与生存通路的改变有关。
XBP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Xbp1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Xbp1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Xbp1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Xbp1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。