Plásmido Doble Nickase (h) XAP8: sc-412247-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)XAP8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa XAP8 (h) y el plásmido de doble nickasa XAP8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RSF1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) XAP8 | sc-412247-NIC | 20 µg | $410.00 |
RSF1 codifica la proteína humana XAP8, un factor asociado a la cromatina implicado en la remodelación de nucleosomas y la regulación de la transcripción mediante interacciones con la maquinaria de remodelación de cromatina dependiente de ATP. Al modular la accesibilidad de la cromatina, RSF1 influye en la sincronización de la replicación del ADN, las respuestas al daño en el ADN y la progresión del ciclo celular, conectándolo con vías más amplias de mantenimiento del genoma. Se han descrito alteraciones en la expresión o en el número de copias de RSF1 en múltiples contextos tumorales, y a menudo se estudia por sus contribuciones a la proliferación, la inestabilidad cromosómica y programas transcripcionales adaptativos al estrés. Estas características hacen de RSF1/XAP8 un objetivo útil para desentrañar mecanismos de regulación epigenética y su papel en fenotipos celulares relevantes para enfermedades.
XAP8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RSF1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RSF1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RSF1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RSF1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.