Xanthine Oxidase Double Nickaseプラスミド (h): sc-401185-NIC

XDH は、モリブデンを含む酸化還元酵素であるキサンチンオキシダーゼをコードしており、ヒポキサンチンをキサンチンへ、さらにキサンチンを尿酸へと変換することで、プリン分解代謝の最終段階を触媒します。これらの反応の過程で本酵素は活性酸素種（ROS）を産生し得るため、XDH 活性はレドックス恒常性、酸化ストレスシグナル、炎症応答と関連づけられます。キサンチンオキシダーゼの機能は、プリン代謝回転と酸化物産生が増加する状況における代謝適応経路や組織傷害プロセスとも交差します。XDH の発現や活性の破綻は、高尿酸血症関連の生物学、内皮機能障害、ならびに心代謝性疾患や炎症性疾患の文脈での酸化損傷と関連していることが報告されており、代謝およびストレス応答研究における機序的標的としての有用性が支持されています。

Xanthine Oxidase ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における XDH 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、XDH内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、XDHの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、XDHが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。