WDR82 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406963-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WDR82O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WDR82 (h) e o Plasmídeo Double Nickase WDR82 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WDR82. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:WDR82 Anticorpo (A-2): sc-518243
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WDR82 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406963-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WDR82 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406963-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O WDR82 humano codifica uma proteína contendo repetições WD que atua como adaptador regulatório em complexos nucleares que controlam a transcrição e o estado da cromatina. O WDR82 é mais conhecido por acoplar o estado de fosforilação do domínio C-terminal (CTD) da RNA polimerase II ao recrutamento de atividades modificadoras de histonas, incluindo a maquinaria de metilação de H3K4, influenciando assim a regulação gênica próxima ao promotor. Por meio dessas funções, contribui para o processamento de RNA e para a fidelidade transcricional em vias que coordenam programas de expressão gênica ao longo do ciclo celular e em contextos de diferenciação. A desregulação do controle de cromatina e transcrição associado ao WDR82 tem sido investigada na biologia do câncer e em outros distúrbios ligados a uma regulação epigenética aberrante.
WDR82 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WDR82 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WDR82. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WDR82. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WDR82 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.