VRL-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423688

Visão geral

Trpv2 codifica o canal VRL-1 (TRPV2) de camundongo, um canal catiônico não seletivo da família vaniloide dos receptores de potencial transitório (TRP) que contribui para o influxo de Ca²⁺ evocado por estímulos. O VRL-1 participa de processos celulares, incluindo mecanossensação e respostas a estresse osmótico ou térmico, e pode modular a sinalização a jusante dependente de cálcio, impactando a excitabilidade de membrana, a dinâmica do citoesqueleto e programas de transcrição. Em linhagens imunes e mieloides, a atividade de TRPV2 tem sido associada à fagocitose e à sinalização inflamatória, enquanto em tecidos excitáveis é estudada no contexto da transdução sensorial. Alterações na função ou na expressão de TRPV2 têm sido investigadas em modelos de dor neuropática, distúrbios inflamatórios, cardiomiopatia e migração celular relacionada ao câncer, sustentando sua relevância como alvo mecanístico em vias diversas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VRL-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trpv2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trpv2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trpv2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VRL-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trpv2 para a investigação da sinalização de VRL-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trpv2 críticos para a função VRL-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trpv2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo VRL-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VRL-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trpv2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo VRL-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VRL-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trpv2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trpv2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.