VpreB1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423683

개요

Vpreb1은 생쥐의 초기 B 림프구 생성 과정에서 pre–B 세포 수용체(pre-BCR)를 형성하는 데 필요한 대체 경쇄(surrogate light chain) 구성요소인 VpreB1을 암호화한다. VpreB1은 λ5(IGLL1) 및 면역글로불린 μ 중쇄와 짝을 이루어 pre-BCR을 이루며, pre-BCR 신호는 증식을 촉진하고 중쇄 대립유전자 배제를 확립하며, SRC 계열 키나아제, SYK/BTK 신호 및 그 하위의 PI3K–AKT와 MAPK 프로그램과 교차하는 경로를 통해 경쇄 재조합을 개시함으로써 pro–B 단계에서 pre–B 단계로의 체크포인트 진행을 조율한다. 이 축이 교란되면 B 세포 발달의 역학이 흐트러지고 레퍼토리 형성이 달라지며, 면역 기능과 관용(tolerance) 메커니즘에도 영향을 줄 수 있다. pre-BCR 기능은 발달 체크포인트 조절과 밀접하게 연관되어 있으므로, Vpreb1은 혈액종양 및 자가면역 연구와 관련된 비정상적 B 세포 성숙과 면역 조절 이상 모델에서 흔히 연구된다.

VpreB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Vpreb1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Vpreb1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Vpreb1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 VpreB1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 VpreB1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Vpreb1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• VpreB1 기능에 중요한 Vpreb1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Vpreb1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• VpreB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 VpreB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Vpreb1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  VpreB1 HDR 플라스미드 (m) 및 VpreB1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Vpreb1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Vpreb1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.