Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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VPRBP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403283-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPRBPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VPRBP (h) e o Plasmídeo Double Nickase VPRBP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DCAF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VPRBP Anticorpo (C-8): sc-376850
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPRBP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403283-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VPRBP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403283-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCAF1 codifica a VPRBP, um receptor de substratos do complexo ligase de ubiquitina E3 CUL4–DDB1 que ajuda a direcionar a ubiquitinação e a degradação proteassomal de alvos proteicos específicos. Por meio da regulação da estabilidade de proteínas, VPRBP contribui para o controle da progressão do ciclo celular, das respostas a danos no DNA e de processos associados à cromatina que influenciam programas de transcrição. VPRBP também tem sido associado a redes de sinalização envolvendo regulação de quinases e controle de checkpoints, o que o torna relevante para estudos de integridade do genoma e de estresse proliferativo. A desregulação da atividade CUL4–DDB1–DCAF1 tem sido associada a alterações na proteostase em contextos relacionados ao câncer e em outros distúrbios nos quais a regulação mediada por ubiquitina é comprometida.
VPRBP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DCAF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DCAF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DCAF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DCAF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.