VEZF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423670

概要

Vezf1は、血管内皮および造血系の文脈で高く発現する亜鉛フィンガー型転写因子VEZF1をコードしており、胚発生期の血管新生や血管パターニングに必要な遺伝子発現プログラムを制御します。VEZF1は、細胞移動、細胞外マトリックスのリモデリング、発生シグナル伝達経路に関連する転写ネットワークを統合することで、内皮分化、血管スプラウティング（芽生え）、および血管の構造的完全性の維持を調節します。Vezf1活性の変化は、マウスモデルにおいて血管形成異常や発生致死と関連づけられており、その制御的役割から、血管奇形や組織の血管化不全の研究において重要です。核内でDNAに結合するタンパク質として、VEZF1は内皮系譜の規定における転写制御を解明するための解析しやすい標的（ノード）にもなります。

VEZF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVezf1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vezf1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vezf1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VEZF1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VEZF1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vezf1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VEZF1の機能に不可欠なVezf1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vezf1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VEZF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびVEZF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vezf1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VEZF1 HDRプラスミド（m）および VEZF1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVezf1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVezf1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。