VAX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423657

Visão geral

Vax1 codifica VAX1, um fator de transcrição homeobox necessário para o padrão embrionário do prosencéfalo e do olho, com papéis marcantes no desenvolvimento do telencéfalo ventral e do pedúnculo óptico. VAX1 regula programas de expressão gênica que coordenam a especificação de progenitores neurais, a orientação axonal e a formação da linha média, integrando-se a vias de sinalização do desenvolvimento, como a ventralização mediada por SHH e outras redes de genes homeobox. Estudos genéticos em camundongos associam a disfunção de Vax1 a fenótipos congênitos craniofaciais e oculares, incluindo microftalmia/anoftalmia e anormalidades da região hipotálamo–hipófise. Essas propriedades tornam VAX1 um nó útil para dissecar o controle transcricional de trajetórias do neurodesenvolvimento e decisões de linhagem.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VAX1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vax1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vax1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vax1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VAX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vax1 para a investigação da sinalização de VAX1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vax1 críticos para a função VAX1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vax1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo VAX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VAX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vax1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo VAX1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VAX1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vax1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vax1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.