UXS1 Plasmide Double Nickase (h): sc-413346-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UXS1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UXS1 Double Nickase Plasmid (h) e il UXS1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UXS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UXS1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413346-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UXS1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413346-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano UXS1 codifica la UDP-glucuronato decarbossilasi 1, un enzima citosolico che converte l’acido UDP-glucuronico in UDP-xilosio, un donatore di zucchero essenziale per la biosintesi di proteoglicani e glicosaminoglicani. Fornendo UDP-xilosio, UXS1 sostiene l’inizio e l’allungamento dei glicoconiugati della matrice extracellulare, influenzando le interazioni cellula–matrice, gli output di glicosilazione della via secretoria e l’omeostasi tissutale. L’alterazione di questa via dei nucleotidi-zucchero può modificare la composizione dei proteoglicani e i conseguenti ambienti di segnalazione che modellano i programmi cellulari di adesione, migrazione e differenziazione. La disregolazione di UXS1 è quindi rilevante per studi meccanicistici della biologia del tessuto connettivo e dei disturbi legati a un’assemblaggio anomalo dei proteoglicani.
UXS1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UXS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UXS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UXS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UXS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.