USP51 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414805

概要

USP51は、脱ユビキチン化に関与するユビキチン特異的プロテアーゼをコードしており、脱ユビキチン化はタンパク質の安定性、局在、ならびにシグナル出力を制御するうえで重要な制御段階です。ユビキチン結合を解除することで、USP51はプロテオスタシスや多タンパク質複合体の動態に影響を及ぼし、その下流で細胞周期の進行、DNA損傷応答、ストレス適応的シグナル伝達などに作用し得ます。脱ユビキチン化酵素の活性変化は、がん生物学で観察されるユビキチン–プロテアソーム系機能の破綻や、ゲノム不安定性または異常シグナル伝達を伴う他の疾患としばしば関連づけられています。そのためUSP51は、ユビキチン依存的経路の制御機構を解明し、ヒト細胞モデルにおける状況依存的な依存性を同定するうえで注目されています。

USP51 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUSP51遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、USP51内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、USP51のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、USP51タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、USP51シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、USP51欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• USP51の機能に不可欠なUSP51エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、USP51ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• USP51 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUSP51 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、USP51遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  USP51 HDRプラスミド（h）および USP51 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUSP51ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUSP51標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。