UGP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408778

概要

UGP2はUDP-グルコースピロホスホリラーゼ2をコードしており、細胞質に存在する酵素として、グルコース-1-リン酸とUTPからUDP-グルコースを可逆的に生成する反応を触媒し、生合成に用いられる中心的な活性化糖ヌクレオチドを供給します。UDP-グルコースはグリコーゲン代謝を支えるとともに、糖鎖複合体や糖脂質産生の前駆体を提供することで糖鎖付加（グリコシル化）経路にも寄与し、タンパク質輸送や細胞間相互作用に影響を与えます。炭水化物フラックスと糖鎖恒常性における役割を通じて、UGP2は代謝リプログラミング、小胞体／ゴルジ体でのプロセシング、ストレス適応といった文脈でしばしば検討されます。UDP-グルコースの利用可能性や糖鎖付加パターンの変化は、代謝性疾患や増殖性疾患に関わる機序全般と広く関連するため、ヒト細胞におけるUGP2の機能解析が動機付けられています。

UGP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUGP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UGP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UGP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UGP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UGP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UGP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UGP2の機能に不可欠なUGP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UGP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UGP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUGP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UGP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UGP2 HDRプラスミド（h）および UGP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUGP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUGP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。