UBXD7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432436

Visão geral

Ubxn7 codifica a UBXD7, um adaptador contendo um domínio UBX que conecta o processamento de substratos dependente de ubiquitina à maquinaria ATPase p97/VCP. A UBXD7 participa da proteostase ao regular o reconhecimento de cadeias de ubiquitina e ao facilitar o processamento de proteínas ubiquitinadas em vias como a degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD) e o controle de qualidade de complexos proteicos parados ou danificados. Por meio dessas funções, a UBXD7 influencia respostas celulares ao estresse, a renovação de proteínas e desfechos de sinalização ligados à dinâmica do sistema ubiquitina–proteassoma. A desregulação de redes de proteostase centradas em p97/VCP é amplamente relevante para a neurodegeneração e para vulnerabilidades associadas ao câncer, tornando Ubxn7 um ponto útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UBXD7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ubxn7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ubxn7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ubxn7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UBXD7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ubxn7 para a investigação da sinalização de UBXD7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ubxn7 críticos para a função UBXD7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ubxn7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo UBXD7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UBXD7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ubxn7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo UBXD7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UBXD7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ubxn7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ubxn7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.