Ubr4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427303-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ubr4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ubr4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Ubr4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ubr4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ubr4 Anticorpo (21-Y): sc-100615
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ubr4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427303-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ubr4 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427303-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ubr4 de camundongo codifica uma ligase E3 de ubiquitina que participa da via ubiquitina–proteassoma da regra do N-terminal (N-end rule), conectando o reconhecimento de substratos à proteostase e à degradação proteica regulada. A UBR4 tem sido implicada no tráfego endocítico, na homeostase de proteínas de membrana e em um controle mais amplo, dependente de ubiquitina, das respostas celulares ao estresse. Por meio dessas funções, a UBR4 influencia a sobrevivência e a diferenciação celular, além de processos neuronais e do desenvolvimento nos quais é necessária uma degradação proteica rigidamente controlada. A desregulação das redes de ubiquitinação e proteostase que envolvem ligases da família UBR é relevante para estudos de neurobiologia, fenótipos cardiometabólicos e vulnerabilidades de sinalização associadas ao câncer em sistemas modelo.
Ubr4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ubr4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ubr4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ubr4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ubr4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.