UBE2J1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425050-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBE2J1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UBE2J1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase UBE2J1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ube2j1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBE2J1 Anticorpo (B-6): sc-377002
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBE2J1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425050-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ube2j1 de camundongo codifica a UBE2J1, uma enzima E2 conjugadora de ubiquitina ancorada à membrana do retículo endoplasmático (RE) que colabora com ligases E3 residentes no RE para promover a degradação associada ao RE (ERAD) de proteínas mal dobradas ou em excesso. Ao fornecer ubiquitina a substratos retrortranslocados do retículo endoplasmático, a UBE2J1 ajuda a manter a proteostase e sustenta a sinalização adaptativa durante o estresse do RE, incluindo a comunicação cruzada com vias da resposta a proteínas mal dobradas (UPR). A disrupção de componentes do ERAD pode alterar a homeostase da via secretória, a sinalização inflamatória e a sensibilidade ao estresse proteotóxico, tornando a UBE2J1 um nó relevante para estudar mecanismos que contribuem para neurodegeneração, disfunção metabólica e remodelamento da proteostase associado ao câncer. Sua atividade também é pertinente a investigações de controle de qualidade de proteínas de membrana e de processamento de antígenos ligado à renovação dependente de ubiquitina.
UBE2J1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ube2j1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ube2j1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ube2j1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ube2j1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.