tsg 101 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400290-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- tsg 101O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase tsg 101 (h) e o Plasmídeo Double Nickase tsg 101 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSG101. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:tsg 101 Anticorpo (C-2): sc-7964
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
tsg 101 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400290-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
tsg 101 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400290-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSG101 codifica o gene de suscetibilidade tumoral 101 (tsg101), um componente central do complexo ESCRT-I, que coordena a triagem endossomal e a biogênese de corpos multivesiculares para regular a redução de receptores na superfície celular e a renovação de proteínas de membrana. Por meio da clivagem de membranas dependente de ESCRT, o TSG101 também contribui para a abscisão durante a citocinese, a formação de exossomos e o brotamento de vírus envelopados, ligando-o a vias de tráfego vesicular e remodelamento de membranas. Sua atividade interage com o reconhecimento de cargas dependente de ubiquitina e a atenuação de sinalização, influenciando a dinâmica de receptores de fatores de crescimento e a proteostase. A desregulação de TSG101 tem sido associada a alterações no tráfego endolisossomal e a estados de sinalização aberrantes observados em diversos cânceres e modelos relacionados a infecção, o que o torna relevante para estudos mecanísticos da homeostase celular.
tsg 101 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSG101 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSG101. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSG101. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSG101 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.