TRPC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423513

概要

Trpc2は、ホスホリパーゼC（PLC）シグナル伝達の下流で受容体作動性のCa2+流入を制御する、陽イオンチャネルであるTRPC（transient receptor potential canonical）ファミリーの一員TRPC2をコードします。マウスでは、TRPC2は鋤鼻系における感覚シグナル伝達と強く関連しており、カルシウム流入が神経細胞の興奮性や、即時早期遺伝子プログラムに影響する下流のMAPK/CaM依存性経路を形成します。これらのカルシウム依存的過程を通じて、Trpc2はフェロモン誘発行動や神経内分泌連関に寄与するため、化学感覚、神経回路機能、行動関連表現型の研究において重要です。Trpc2の機能破壊は、TRPチャネル媒介性のカルシウム動態が感覚処理と個体応答をどのように協調させるかを検討するために、一般的に用いられます。

TRPC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTrpc2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Trpc2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Trpc2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRPC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRPC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Trpc2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRPC2の機能に不可欠なTrpc2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Trpc2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRPC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTRPC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Trpc2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRPC2 HDRプラスミド（m）および TRPC2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTrpc2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTrpc2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。