Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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translin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423528
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- translin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico translin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: translin Anticuerpo (C-2): sc-390472
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
translin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423528 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Tsn de ratón codifica translin, una proteína conservada de unión a ARN y ADN que forma un complejo heteromérico con trax (TSNAX) y participa en la regulación génica postranscripcional. Translin se ha relacionado con el transporte y la estabilidad del ARN, el procesamiento de microARN a través del complejo nucleasa C3PO y la modulación de la traducción localizada en contextos neuronales y de células germinales. Mediante estas actividades, TSN influye en la señalización sensible al estrés y en programas de expresión génica que determinan la proliferación y la diferenciación celular. Las redes de regulación del ARN asociadas a TSN alteradas se han implicado en fenotipos neuroconductuales y en la regulación metabólica, lo que convierte a Tsn en un locus útil para desentrañar mecanismos mediados por ARN en modelos relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO translin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tsn en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tsn junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tsn tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína translin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tsn para la investigación de la señalización de translin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tsn críticos para la función de translin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tsn para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido translin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido translin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tsn. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR translin (m) y el plásmido HDR translin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tsn para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tsn definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.